📖 16 mins.

Ронен Шавит1, Майя Илуз, Тали Файнберг, Яаков Ричард Лоуренс, Йосси Цур, Нир Пелед

1 Центр исследования и выявления торакального рака, Медицинский центр Шиба Тель Хашомер, Рамат-Ган, 52621, POB 244, Израиль.
e-mail: [email protected]
URL: http://medicine.mytau.org/peled/

Y

. R.Lawrence
Center for Translational Research in Radiation Oncology, Sheba Medical Center, Ramat-Gan, Israel
M. Ilouze : N. Peled
Thoracic Cancer Service, Davidoff Cancer Center, Rabin Medical Center, Petach Tikva, Israel

Correspondence: [email protected]

Accepted: 10 декабря 2014 г.
Опубликовано: 7 января 2015 г

Аннотация

Введение: Рак легких является ведущей причиной смерти от рака. Лучевая терапия играет ключевую роль в его лечении. Ионизирующее излучение вызывает гибель клеток через хромосомные аберрации, которые запускают митотическую катастрофу и апоптоз. Однако многие больные раком легких демонстрируют устойчивость к радиации. Дихлорацетат (ДХА) — это небольшая молекула, которая может способствовать активации митохондрий путем увеличения притока пирувата. Здесь мы проверили, может ли ДХА повысить чувствительность клеток немелкоклеточного рака легких (НМРЛ) к облучению через этот механизм.

Методы: Две репрезентативные линии клеток НМРЛК (A549 и H1299) были протестированы на чувствительность к радиации с предварительным воздействием DCA и без него. Эффективность лечения оценивалась с помощью анализа выживаемости клоногенов. Для оценки влияния DCA на потребление кислорода клетками в качестве суррогатного маркера митохондриальной активности использовался анализатор внеклеточных потоков.

Результаты: Мы обнаружили, что DCA увеличивает скорость потребления кислорода в клетках A549 и H1299 на 60% (p = 0,0037) и 20% (p = 0,0039), соответственно. Предварительное воздействие DCA за час до облучения увеличило уровень цитотоксической смерти в 4 раза в клетках A549 (55-13%, p = 0,004) и в 2 раза в клетках H1299 (35-17%, p = 0,28), соответственно, по сравнению с облучением.

Выводы: Индукция митохондрий под действием DCA может служить радиосенсибилизатором при немелкоклеточном раке легкого.


Ключевые слова: НМРЛК; ДКА; митохондрии; радиация; радиосенсибилизатор; эффект Варбурга

© Международное общество клеточной онкологии 2015


ВВЕДЕНИЕ

Рак легких является основной причиной смертности от рака в США, общая 5-летняя выживаемость на всех стадиях составляет ~17 % [1-4]. Лучевая терапия (ЛТ) играет важную роль в клиническом ведении пациентов с раком легкого, особенно тех, кто имеет стадию заболевания IIIB и является кандидатом на окончательную химиолучевую терапию. Кроме того, РТ может применяться в качестве неоадъювантной или адъювантной терапии на стадии IIIA, или аблятивно, когда применяется стереотаксическая радиотерапия тела (SBRT). Радиационно-индуцированный пневмонит (РИП) является ограничивающим фактором при лечении пациентов с помощью РТ. Чтобы минимизировать RIP, онкологи стремятся к тому, чтобы V20 (т.е. процент объема легких, получивших дозу облучения ≥20 Гр) не превышал 22 % [5]. Радиосенсибилизаторы могут повысить цитотоксическую эффективность облучения, тем самым потенциально улучшая показатели излечения без увеличения V20.

РТ убивает клетки, вызывая двухцепочечные разрывы ДНК. Не восстановленные разрывы ДНК приводят к хромосомным аберрациям, которые, в свою очередь, приводят к «митотической катастрофе» — способу гибели клеток, возникающему в результате преждевременного или неправильного вступления клеток в митоз [6,7]. Кроме того, радиация может непосредственно воздействовать на клеточные мембраны и органеллы. Хотя эти последние изменения пока плохо изучены, они могут привести к изменениям в передаче сигналов, экспрессии генов, стабильности белков, клеточных окислительно-восстановительных состояниях и регуляции клеточного цикла, что в совокупности может привести к апоптозу [8]. Более того, радиация может индуцировать выработку митохондриальных реактивных форм кислорода (ROS), сопровождающуюся повышением регуляции функций электронно-транспортной цепи митохондрий, тем самым увеличивая мембранный потенциал митохондрий, митохондриальное дыхание и выработку АТФ в митохондриях [9,10]. Однако генетические изменения ограничивают способность раковых клеток подвергаться апоптозу, что позволяет предположить, что гипоксическая микросреда опухоли может оказывать селективное давление на устойчивый к апоптозу фенотип рака и, как следствие, устойчивость к РТ [11]. В связи с таким фенотипом устойчивости к РТ и значительными побочными эффектами, вызываемыми самой РТ, крайне важно изучить способы радиосенсибилизации клеток рака легкого, чтобы снизить дозы облучения и улучшить ответ на терапию.

Многие опухолевые клетки демонстрируют повышенный уровень поглощения глюкозы и пониженный уровень окислительного фосфорилирования. Этот парадоксальный гипергликолиз и отсутствие митохондриальной активности в присутствии кислорода известен как эффект Варбурга (изображен на рис. 1) [12]. Уникальный метаболизм большинства солидных опухолей обусловлен ремоделированием митохондриальных функций для создания гликолитического фенотипа и сильной устойчивости к апоптозу [13]. Растет число доказательств того, что митохондрии могут быть основной мишенью для терапии рака [14-17]. Ремоделирование, специфичное для рака, можно обратить вспять с помощью небольшой молекулы дихлорацетата (DCA) [18], которая ингибирует киназу пируватдегидрогеназы (PDK), тем самым увеличивая приток пирувата в митохондрии и способствуя его окислению посредством митохондриальной активности по сравнению с гликолизом в различных типах рака (изображено на рис. 1) [13,18]. Повышение митохондриальной активности вызывает увеличение количества и степени высвобождения свободных радикалов (ROS) в клетке, что приводит к повышению клеточной апоптотической активности [13].

Рисунок 1. Схематическое изображение предполагаемого действия DCA на раковые клетки, подвергшиеся облучению. На левой панели изображен эффект Варбурга: даже в присутствии кислорода метаболизм раковых клеток основан на гликолизе. Это происходит за счет внутриклеточной экспрессии PDK, которая, в свою очередь, ингибирует действие PDH. В результате подавляется приток пирувата в митохондрии и, таким образом, митохондриальная активность. Несмотря на повреждение ДНК, вызванное радиацией, раковые клетки не могут подвергнуться эффективному апоптозу, поскольку модуляторы апоптоза, такие как реактивные формы кислорода (ROS), остаются в митохондриях. На правой панели показан эффект DCA: DCA отменяет ингибирование PDH путем ингибирования PDK. Следовательно, DCA увеличивает приток пирувата в митохондрии и, таким образом, митохондриальную активность. Помимо повреждения ДНК под воздействием радиации, из митохондрий высвобождаются модуляторы апоптоза, и, следовательно, раковые клетки подвергаются более высокой скорости апоптоза

Здесь мы исследовали потенциальный радиосенсибилизирующий эффект DCA в клетках NSCLC. Наши результаты показывают, что активация митохондрий под действием DCA повышает чувствительность к радиации как клеток A549, так и клеток H1299, полученных из NSCLC.

Материалы и методы

Культуры клеток
В данном исследовании использовались две линии клеток немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ): A549, полученная из аденокарциномы человека, и H1299, полученная из крупноклеточной карциномы человека. Обе клеточные линии были приобретены у ATCC. Клетки культивировали в среде RPMI-1640, дополненной 10 % фетальной бычьей сыворотки (FBS), 1 % пенициллина/стрептомицина и 1 % глутамата при 37 °C в увлажненной атмосфере 5 %CO2.

Условия лечения
Дихлорацетат (DCA, Sigma 34795) добавляли в культуральную среду за 1 ч до облучения в концентрации 10 и 20 мМ в случае клеток H1299 и 40 и 60 мМ в случае клеток A549, согласно соответствующим значениям IC50. Клетки облучали с помощью облучателя Kimtron Polaris при мощности дозы 0,9 Гр/мин при комнатной температуре.

Клоногенный анализ выживаемости
Клоногенный анализ выживаемости, который мы использовали, был описан ранее [19]. Вкратце, клетки отделяли с помощью трипсина, суспендировали в полной культуральной среде, подсчитывали и высевали в 3 мл посуду при плотности 200 клеток на блюдо, а затем оставляли для прикрепления и стабилизации на ночь. На следующий день испытуемые группы обрабатывали DCA (или контролем) за 1 ч до облучения в указанных концентрациях. Клетки были облучены дозами 0, 2, 4 и 6 Гр. После инкубации в течение 48 ч культуральная среда была удалена и заменена свежей культуральной средой без ДКА (все группы). Клетки инкубировали еще 10 дней для образования колоний. Затем колонии фиксировали и окрашивали 0,5 % кристаллическим фиолетовым в 96 % этаноле. Колонии, содержащие не менее 50 жизнеспособных клеток, подсчитывали (рис. 2). Каждый эксперимент проводился в двух экземплярах, а среднее значение и стандартное отклонение рассчитывались по результатам трех независимых экспериментов.

Рисунок 2. Блок-схема анализа выживаемости клоногенных клеток

Оценка синергизма
Для того чтобы оценить, проявляют ли графики лечения синергический эффект, были построены графики средних значений и стандартных отклонений выживаемости относительно доз облучения. Были рассчитаны проценты выживаемости, как для групп, обработанных, так и необработанных DCA, по отношению к необлученным клеткам:

где:

В частности, образование колоний в группах, обработанных DCA и не обработанных DCA без лучевой терапии, нормировали на 100 %. Синергетические эффекты определялись с помощью двустороннего ANOVA (p < 0,05) [20].

Анализ потребления кислорода
Потребление кислорода использовалось в качестве суррогатного маркера митохондриальной активности. Измерения проводили с помощью анализатора внеклеточного потока XF24 (Seahorse Biosciences). В этом приборе используются оптические датчики на основе флуоресценции и изготовленные на заказ многолуночные планшеты для проведения повторных измерений потребления кислорода интактными клетками, растущими в виде монослоя. Клетки H1299 и A549 высевали в планшеты Seahorse XF24 из расчета 10 000 и 20 000 клеток на лунку, соответственно, в ростовую среду. Клетки инкубировали в течение 48 ч при 37 °C в 5 %CO2. Затем клетки промывали, переносили в среду для анализа XF/PBS и инкубировали в течение 60 мин при 37 °C безCO2 перед началом эксперимента. После установления базовой скорости потребления кислорода к клеткам H1299 и A549 добавляли 20 и 40 мМ DCA, соответственно. Измерения потребления кислорода продолжали в течение 25 мин. Данные были получены как минимум из трех копий планшетов для каждой линии клеток. Результаты представлены в процентах от базовой скорости дыхания.

Статистический анализ
Статистическую значимость оценивали с помощью t-теста Стьюдента. Синергизм оценивали с помощью двухстороннего ANOVA [20]. Значение p< 0,05 считалось значимым.

Результаты

DCA радиосенсибилизирует клетки NSCLC
Известно, что дихлорацетат (DCA) повышает активность митохондрий [10,15] и ранее было показано, что он действует как радиосенсибилизатор на нескольких линиях раковых клеток, полученных из опухолей простаты, толстой кишки и мозга [21, 22]. Здесь было исследовано его действие на две клеточные линии, полученные из немелкоклеточного рака легких (NSCLC), а именно A549 (аденокарцинома) и H1299 (крупноклеточная карцинома). Концентрации DCA, использованные для каждой клеточной линии, соответствовали соответствующим значениям IC50 (A549: 63 мМ и H1299: 36 мМ; рис. 3a и b).

Рисунок 3. Клоногенная выживаемость клеток NSCLC, обработанных возрастающими концентрациями DCA. a Клетки A549, обработанные 20, 40, 60 и 80 мМ DCA. b Клетки H1299, обработанные 10, 20, 30 и 50 мМ DCA. c Клетки A549, обработанные дозами радиации 2, 4, 6 Гр отдельно и в сочетании с 40 и 60 мМ DCA. d Клетки H1299, обработанные дозами радиации 2, 4, 6 Гр отдельно и в сочетании с 10 и 20 мМ DCA. *p< 0,05 по сравнению с контролем

Мы обнаружили, что предварительное облучение DCA увеличивало гибель клеток в образцах клеток A549 и H1299. Максимальный эффект в клетках A549 наблюдался при 4 Гр, где обработка DCA (40 и 60 мМ) снижала выживаемость клеток с ~55 до 40 % (p= 0,27) и 13 % (p= 0,004), соответственно (рис. 3c). В клетках H1299 максимальный эффект был достигнут при 6 Гр. При этой дозе облучения обработка DCA (10 и 20 мМ) снижала выживаемость клеток с 35 % (только облучение) до 25 и 17 %, соответственно (статистически не значимо; рис. 3г). Предварительное облучение клеток A549 DCA (60 мМ) увеличило цитотоксический эффект облучения в 4 Гр в 4 раза по сравнению с облучением в одиночку. Двухсторонний анализ ANOVA показал синергетический эффект только в клетках A549.

DCA увеличивает потребление кислорода в клетках A549 и H1299
Увеличение скорости потребления кислорода (OCR) клетками свидетельствует о повышенной активности митохондрий [23]. Мы обнаружили, что DCA увеличивает OCR в клетках A549 и H1299 на 60 % (p= 0,0037) и 20 % (p= 0,0039), соответственно, по сравнению с базальной OCR (рис. 4).

Рисунок 4. Скорость потребления кислорода (OCR) в клетках A549 и H1299. DCA добавляли через ~16 мин. a 20 мМ DCA добавляли в клетки H1299. b 40 мМ DCA добавляли в клетки A549. Изменения OCR измерялись относительно базального состояния. ДКА увеличивал скорость потребления кислорода в клетках A549 и H1299 на 60 %(p= 0,0037) и 20 %(p= 0,0039), соответственно

Обсуждение

Проверив чувствительность к радиации с предварительным воздействием дихлорацетата (ДХА) и без него, мы обнаружили, что активация митохондрий с помощью ДХА может вызвать радиосенсибилизацию двух различных клеточных линий немелкоклеточного рака легких (НМРЛ) (т.е. A549 и H1299). В этом доказательном исследовании использовался широкий диапазон концентраций DCA с целью подбора дозы в соответствии со значением IC50 для каждой клетки. Синергетический эффект DCA был статистически значимым в клетках A549, в то время как в клетках H1299 он лишь приближался к значимости. Возможно, еще более сильный эффект может быть получен при более высоких дозах DCA. Мы также показали, что DCA увеличивает потребление кислорода в клетках A549 и H1299, что является суррогатным маркером повышенной митохондриальной активности.

Ионизирующее излучение повышает функцию митохондриальной электронно-транспортной цепи, увеличивает мембранный потенциал митохондрий и производство АТФ [9]. Гипер-активация митохондрий под действием DCA еще больше увеличивает количество и степень высвобождения свободных радикалов (ROS) самими митохондриями [13]. Эти факторы могут объяснить синергетический эффект, наблюдаемый при предварительном воздействии DCA на клетки перед началом облучения.

Аткинсон и др. [15] показали, что ингибирование пероксидазы цитохрома с и высвобождение цитохрома с из митохондрий смягчает индуцированную радиацией гибель клеток. Lee et al. [24] наблюдали снижение ингибирования ROS-опосредованной гибели клеток путем блокирования ядерного фактора эритроидного 2 (nrf2)-зависимого антиоксидантного ответа, что повышает радиочувствительность клеток H1299, A549 и H640. Эти исследования показали способность влиять на клеточную реакцию на радиацию путем вмешательства в процессы, связанные с цитохромом c и ROS, что подтверждает наше предположение о том, что DCA радиосенсибилизирует раковые клетки через активацию митохондрий, которая позволяет высвобождать ROS.

Cao et al. [21] также сообщили, что DCA действует как радиосенсибилизатор на клетки рака простаты. Zwicker et al. [22] обнаружили, что DCA действует как радиосенсибилизатор in vitro, но не in vivo в клетках WIDR (колоректальный рак) и LN18 (глиома). Отсутствие синергизма в ксенотрансплантационной модели WIDR in vivo было объяснено буферным эффектом среды, который мог позволить опухолевым клеткам поддерживать гликолитическую метаболическую программу. Исследования, демонстрирующие in vivo эффект DCA и облучения в NSCLC, еще предстоит провести.

Облучение является распространенной терапией для больных раком легких. Однако значительный ущерб, который она наносит окружающим нормальным тканям, ограничивает ее применение. За последние два десятилетия фармакологические ингибиторы сигнальных молекул, регулирующих апоптотический потенциал, показали перспективность в качестве радиосенсибилизаторов in vitro [25,29]. Хотя DCA был зарегистрирован как радиосенсибилизатор при раке простаты [21], его клиническое применение в NSCLC до сих пор не доказано. Здесь мы показываем способность DCA снижать дозы облучения в клетках A549 и H1299 NSCLC без снижения уровня эффекта. Кроме того, показав, что обработка DCA увеличивает потребление кислорода клетками A549 и H1299, мы раскрыли потенциал DCA действовать как активатор митохондрий. Таким образом, мы пришли к выводу, что активация митохондрий может играть определенную роль в терапии NSCLC в сочетании с лучевой терапией. Кроме того, мы предполагаем, что индукция повышенной митохондриальной активности, т.е. повышенное высвобождение свободных радикалов и апоптоз под действием DCA, является основной причиной потенциала DCA в радиосенсибилизации клеток NSCLC.

Подводя итог, мы показали, что индукция митохондрий ДКА in vitro значительно повышает радиосенсибилизацию клеток A549 NSCLC синергетическим образом. Это наблюдение заслуживает дальнейшей оценки в условиях in vivo.

Благодарности

Авторы благодарят доктора Шошану Паглин (Медицинский центр Шиба) за руководство и плодотворные обсуждения данной работы.

Эта работа была выполнена в рамках частичного выполнения требований к докторской диссертации медицинского факультета имени Саклера Тель-Авивского университета и была поддержана медицинским центром «Шиба». (Г-н Ронен Шавит)

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что у них нет конфликта интересов.

ССЫЛКИ

1 Р. Сигел, К. ДеСантис, К. Вирго, К. Штайн, А. Мариотто, Т. Смит, Д. Купер, Т. Ганслер, К. Лерро, С. Федева, К. Лин, К. Лич, Р.С. Каннади, Х. Чо, С. Скоппа, М. Хачей, Р. Кирх, А. Джемаль, Э. Уорд, Статистика лечения рака и выживаемости, 2012. CA Cancer J. Clin. 62(4), 220-241 (2012)
2 Q. Wu, Y.F. Chen, J. Fu, Q.H. You, S.M. Wang, X. Huang, X.J. Feng, S.H. Zhang, Short hairpin RNA-mediated down-regulation of CENP-A attenuates the aggressive phenotype of lung adenocarcinoma cells. Cell. Oncol. 37(6), 399-407 (2014)
3 А. Корен, Х. Мотальн, Т. Куфер, Стволовые клетки рака легких: биологическая и клиническая перспектива. Cell. Oncol. 36(4), 265-275 (2013)
4 N. Peled, M.W. Wynes, N. Ikeda, T. Ohira, K. Yoshida, J. Qian, M. Ilouze, R. Brenner, Y. Kato, C. Mascaux, F.R. Hirsch, Insulin-like growth factor-1 receptor (IGF-1R) as a biomarker for resistance to the tyrosine kinase inhibitor gefitinib in non-small cell lung cancer. Cell. Oncol. 36(4), 277-288 (2013)
5 M.V. Graham, J.A. Purdy, B. Emami, W. Harms, W. Bosch, M.A. Lockett, C.A. Perez, Клинический анализ гистограммы доза-объем для пневмонита после 3D-терапии немелкоклеточного рака легкого (NSCLC). Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 45(2), 323-329 (1999)
6 Х. Вакифахметоглу, М. Олссон, Б. Животовский, Смерть через трагедию: митотическая катастрофа. Cell Death Differ. 15(7), 1153-1162 (2008)
7 Дж. Томс, Р.Г. Бристоу, Таргетинг репарации ДНК и радиотерапия: фокус на терапевтическом соотношении. Semin. Radiat. Oncol. 20(4), 217-222 (2010)
8 C. Coleman, Beneficial liaisons: radiobiology meets cellular and molecular biology. Radiother Oncol: J. Eur. Soc. Ther. Radiol. Oncol. 28(1), 1-15 (1993)
1 T. Yamamori, H. Yasui, M. Yamazumi, Y. Wada, Y. Nakamura, H. Nakamura, O. Inanami, Ionizing radiation induces mitochondrial reactive oxygen species production accompanied by upregulation of mitochondrial electron transport chain function and mitochondrial content under control of the cell cycle checkpoint. Free Radic. Biol. Med. 53(2), 260-270 (2012)
10 I. Szumiel, Ionising radiation-induced oxidative stress, epigenetic changes and genomic instability: the pivotal role of mitochondria. Int J Radiat Biol. 1-55 (2014)
11 B.A. Rupnow, S.J. Knox, Роль радиационно-индуцированного апоптоза как детерминанта ответа опухоли на лучевую терапию. Апоптоз 4(2), 115-143 (1999)
12 Р.А. Кэрнс, И.С. Харрис, Т.В. Мак, Регуляция метаболизма раковых клеток. Nat. Rev. Cancer 11(2), 85-95 (2011)
13 E.D. Michelakis, L. Webster, J.R. Mackey, Дихлорацетат (DCA) как потенциальная метаболическая таргетная терапия рака. Br. J. Cancer 99(7), 989-994 (2008)
14 X. Wang, S. Peralta, C.T. Moraes, Митохондриальные изменения во время канцерогенеза: обзор метаболических преобразований и мишеней для противораковых методов лечения. Adv. Cancer Res. 119, 127-160 (2013)
15 J. Atkinson, A.A. Kapralov, N. Yanamala, Y.Y. Tyurina, A.A. Amoscato, L. Pearce, J. Peterson, Z. Huang, J. Jiang, A.K. Samhan-Arias, A. Maeda, W. Feng, K. Wasserloos, N.A. Belikova, V.A. Tyurin, H. Wang, J. Fletcher, Y. Wang, I.I. Vlasova, J. Klein-Seetharaman, D.A. Stoyanovsky, H. Bayir, B.R. Pitt, M.W. Epperly, J.S. Greenberger, V.E. Kagan, A mitochondria-targeted inhibitor of cytochrome c peroxidase mitigates radiation-induced death. Nat. Commun. 2, 497 (2011)
16 S.H. Kim, Y.H. Yoo, J.H. Lee, J.W. Park, Mitochondrial NADP(+)-dependent isocitrate dehydrogenase knockdown inhibits tumorigenicity of melanoma cells. Биохим. Biophys. Res. Commun. 451(2), 246-251 (2014)
17 З. Татаркова, С. Кука, М. Петрас, П. Ракай, Я. Лехоцкий, Д. Доброта, П. Каплан, Почему митохондрии являются отличными мишенями для терапии рака. Клин. Onkol. 25(6), 421-426 (2013)
18 S. Bonnet, S.L. Archer, J. Allalunis-Turner, A. Haromy, C. Beaulieu, R. Thompson, C.T. Lee, G.D. Lopaschuk, L. Puttagunta, G. Harry, K. Hashimoto, C.J. Porter, M.A. Andrade, B. Thebaud, E.D. Michelakis, A mitochondria-K+ channel axis is suppressed in cancer and its normalization promotes apoptosis and inhibits cancer growth. Cancer Cell 11(1), 37-51 (2007)
19 Н.А. Франкен, Х.М. Родермонд, Дж. Стап, Дж. Хавеман, К. ван Бри, Клоногенный анализ клеток in vitro. Nat. Protoc. 1(5), 2315-2319 (2006)
20 Б.К. Слинкер, Статистика синергизма. J. Mol. Cell. Cardiol. 30(4), 723-731 (1998)
21 W. Cao, S. Yacoub, K.T. Shiverick, K. Namiki, Y. Sakai, S. Porvasnik, C. Urbanek, C.J. Rosser, Dichloroacetate (DCA) sensitizes both wild-type and over expressing Bcl-2 prostate cancer cells in vitro to radiation. Простата 68(11), 1223-1231 (2008)
22 F. Zwicker, A. Kirsner, P. Peschke, F. Roeder, J. Debus, P.E. Huber, K.J. Weber, Дихлорацетат вызывает специфическую для опухоли радиочувствительность in vitro, но ослабляет вызванную радиацией задержку роста опухоли in vivo. Strahlenther. Onkol. 189(8), 684-692 (2013)
23I. Papandreou, R.A. Cairns, L. Fontana, A.L. Lim, N.C. Denko, HIF-1 mediates adaptation to hypoxia by active downregulating mitochondrial oxygen consumption. Cell Metab. 3(3), 187-197 (2006)
24 S. Lee, M.J. Lim, M.H. Kim, C.H. Yu, Y.S. Yun, J. Ahn, J.Y. Song, Эффективная стратегия повышения радиочувствительности клеток рака легких человека путем блокирования Nrf2-зависимых антиоксидантных реакций. Free Radic. Biol. Med. 53(4), 807-816 (2012)
25 S.J. Chmura, H.J. Mauceri, S. Advani, R. Heimann, M.A. Beckett, E. Nodzenski, J. Quintans, D.W. Kufe, R.R. Weichselbaum, Decreasing the apoptotic threshold of tumor cells through protein kinase C inhibition and sphingomyelinase activation increases tumor kill by ionizing radiation. Cancer Res. 57(19), 4340-4347 (1997)
26 В. Бхардвадж, Й. Чжан, М.А. Кортез, К.К. Анг, Д. Молкентин, А. Мунши, У. Раджу, Р. Комаки, Дж.В. Хеймах, Дж. Уэлш, C-Met ингибитор MK-8003 радиосенсибилизирует c-Met-экспрессирующие клетки немелкоклеточного рака легкого с радиационно-индуцированной экспрессией c-Met. J. Thorac. Oncol. 7(8), 1211-1217 (2012)
27 E.J. Bernhard, G. Kao, A.D. Cox, S.M. Sebti, A.D. Hamilton, R.J. Muschel, W.G. McKenna, The farnesyltransferase inhibitor FTI-277 radiosensitizes H-ras-transformed rat embryo fibroblasts. Cancer Res. 56(8), 1727-1730 (1996)
28 H.J. Boeckman, K.S. Trego, J.J. Turchi, Cisplatin sensitizes cancer cells to ionizing radiation through inhibition of nonhomologous end joining. Mol. Cancer Res. 3(5), 277-285 (2005)
29 Н. Балабан, Дж. Мони, М. Шеннон, Л. Данг, Э. Мерфи, Т. Голдкорн, Влияние ионизирующего излучения на сигнальную трансдукцию: антитела к рецептору EGF сенсибилизируют клетки A431 к радиации. Biochim. Biophys. Acta 1314(1-2), 147-156 (1996)

Связанный контент:

Добавить комментарий