📖 17 mins.

Ronen Shavit1, Maya Ilouze, Tali Feinberg, Yaacov Richard Lawrence, Yossi Tzur, Nir Peled

1 Centrum voor onderzoek en opsporing van thoraxkanker, Sheba Medical Center Tel Hashomer, Ramat-Gan, 52621, POB 244, Israël.
e-mail: [email protected]
URL: http://medicine.mytau.org/peled/

Y. R.Lawrence
Center for Translational Research in Radiation Oncology, Sheba Medical Center, Ramat-Gan, Israël
M. Ilouze : N. Peled
Thoracic Cancer Service, Davidoff Cancer Center, Rabin Medical Center, Petach Tikva, Israël

Correspondentie: [email protected]

Geaccepteerd: 10 december 2014
Gepubliceerd: 7 januari 2015

Abstract

Inleiding: Longkanker is de belangrijkste oorzaak van sterfte door kanker. Bestralingstherapie speelt een sleutelrol in de behandeling ervan. Ioniserende straling induceert celdood door chromosoomafwijkingen, die mitotische catastrofe en apoptose in gang zetten. Veel longkankerpatiënten zijn echter resistent tegen bestraling. Dichlooracetaat (DCA) is een kleine molecule die mitochondriale activering kan bevorderen door de instroom van pyruvaat te verhogen. Hier hebben we getest of DCA via dit mechanisme de gevoeligheid van niet-kleincellige longkankercellen (NSCLC) voor bestraling kan verhogen.

Methoden: Twee representatieve NSCLC-cellijnen (A549 en H1299) werden getest op hun gevoeligheid voor bestraling met en zonder voorafgaande blootstelling aan DCA. De doeltreffendheid van de behandeling werd geëvalueerd met behulp van een clonogene overlevingstest. Een extracellulaire fluxanalysator werd gebruikt om het effect van DCA op het cellulaire zuurstofverbruik als surrogaatmarker voor mitochondriale activiteit te beoordelen.

Resultaten: Wij vonden dat DCA het zuurstofverbruik in zowel A549 als H1299 cellen verhoogt met respectievelijk 60% (p = 0,0037) en 20% (p = 0,0039). Voorafgaande blootstelling aan DCA een uur voor bestraling verhoogde de cytotoxische sterfte in A549 cellen met een factor 4 (55 tot 13%, p = 0,004) en in H1299 cellen met een factor 2 (35 tot 17%, p = 0,28) in vergelijking met bestraling alleen.

Conclusie: Mitochondriale inductie door DCA kan dienen als een radio-sensitizer in niet-kleincellige longkanker.


Trefwoorden: NSCLC; DCA; Mitochondriën; Straling; Radio-sensitizer; Warburg effect

© Internationale Vereniging voor Cellulaire Oncologie 2015


INLEIDING

Longkanker is de belangrijkste oorzaak van kanker gerelateerde sterfgevallen in de Verenigde Staten met een totale 5-jaars overleving voor alle stadia van ~17% [1-4]. Bestralingstherapie (RT) speelt een belangrijke rol in de klinische behandeling van longkankerpatiënten, met name patiënten met stadium IIIB ziekte die in aanmerking komen voor definitieve chemo-radiotherapie. Daarnaast kan RT worden toegepast als neoadjuvante of adjuvante therapie in stadium IIIA, of op ablatieve wijze wanneer stereotactische lichaamsradiotherapie (SBRT) wordt toegepast. Stralingsgeïnduceerde pneumonitis (RIP) is de beperkende factor bij de behandeling van patiënten met RT. Om RIP te minimaliseren streven oncologen ernaar de V20 (d.w.z. het percentage van het longvolume dat een stralingsdosis van ≥20 Gy ontvangt) onder 22 % te houden [5]. Radiosensibilisatoren kunnen de cytotoxische doeltreffendheid van de bestraling verhogen, waardoor het genezingspercentage mogelijk verbetert zonder de V20 te verhogen.

RT doodt cellen door DNA dubbelstrengsbreuken te veroorzaken. Niet-gerepareerde DNA-breuken resulteren in chromosoomafwijkingen die op hun beurt leiden tot “mitotische catastrofe” – een wijze van celdood die het gevolg is van de voortijdige of onjuiste start van cellen in de mitose [6,7]. Bovendien kan straling de celmembranen en organellen rechtstreeks aantasten. Hoewel over deze laatste veranderingen nog weinig bekend is, kunnen zij leiden tot veranderingen in signaaltransductie, genexpressie, eiwitstabiliteit, cellulaire redoxtoestanden en celcyclusregulatie, die alle tot apoptose kunnen leiden [8]. Bovendien kan straling de productie van mitochondriale reactieve zuurstofspecies (ROS) induceren, gepaard gaande met up-regulatie van de functies van de mitochondriale elektronentransportketen, waardoor het mitochondriaal membraanpotentieel, de mitochondriale ademhaling en de mitochondriale ATP-productie toenemen [9,10]. Genetische veranderingen beperken echter het vermogen van kankercellen om apoptose te ondergaan, hetgeen suggereert dat hypoxische tumormicro-omgevingen een selectieve druk kunnen uitoefenen in de richting van een apoptose-resistent kankerfenotype en, als gevolg daarvan, resistentie tegen RT [11]. Vanwege dit RT-resistente fenotype en de aanzienlijke bijwerkingen van RT zelf, is het van cruciaal belang manieren te onderzoeken om longkankercellen radiogevoelig te maken teneinde de stralingsdoses te verlagen en de respons op de therapie te verbeteren.

Veel tumorcellen vertonen verhoogde niveaus van glucose-opname en verlaagde niveaus van oxidatieve fosforylering. Deze paradoxale hyper-glycolyse en gebrek aan mitochondriale activiteit in aanwezigheid van zuurstof staat bekend als het Warburg-effect (afgebeeld in fig. 1) [12]. Het unieke metabolisme van de meeste vaste tumoren vloeit voort uit het hermodelleren van de mitochondriale functies om een glycolytisch fenotype en een sterke weerstand tegen apoptose te produceren [13]. Er zijn steeds meer aanwijzingen dat mitochondriën de primaire doelwitten voor kankertherapieën kunnen zijn [14-17]. Kankerspecifieke remodellering kan worden omgekeerd door een kleine molecule genaamd dichlooracetaat (DCA) [18], die pyruvaat dehydrogenase kinase (PDK) remt, waardoor de instroom van pyruvaat in de mitochondriën toeneemt en de oxidatie ervan via mitochondriale activiteit wordt bevorderd in plaats van glycolyse in verschillende kankertypes (afgebeeld in Fig. 1) [13,18]. Een toename van de mitochondriale activiteit veroorzaakt een toename van zowel de hoeveelheid als de omvang van het vrijkomen van vrije radicalen (ROS) in de cel, wat leidt tot een toename van de cellulaire apoptoseactiviteit [13].

Figuur 1. Schematische voorstelling van het voorgestelde effect van DCA op aan straling blootgestelde kankercellen. Het linkerpaneel toont het Warburg-effect: zelfs in aanwezigheid van zuurstof berust het metabolisme van kankercellen op glycolyse. Dit wordt bereikt door de intracellulaire expressie van PDK, die op zijn beurt de werking van PDH remt. Het resultaat is remming van de toevoer van pyruvaat naar de mitochondriën en dus van de mitochondriale activiteit. Ondanks de door straling veroorzaakte DNA-schade zijn kankercellen niet in staat een efficiënte apoptose te ondergaan, omdat apoptotische modulatoren zoals reactieve zuurstofsoorten (ROS) in de mitochondriën achterblijven. Het rechterpaneel toont het effect van DCA: DCA heft de remming van PDH op door PDK te remmen. Bijgevolg verhoogt DCA de instroom van pyruvaat in de mitochondriën en dus de mitochondriale activiteit. Naast de DNA-schade als gevolg van straling komen er apoptotische modulatoren vrij uit de mitochondriën en ondergaan kankercellen dus een hogere apoptosetempo

Hier onderzochten we het potentiële radiogevoelige effect van DCA in NSCLC-cellen. Onze resultaten wijzen erop dat mitochondriale activering door DCA de gevoeligheid voor straling verhoogt in zowel A549 als H1299 NSCLC-cellen.

Materialen en methoden

Celculturen
In deze studie werden twee niet-kleincellige longkanker (NSCLC) cellijnen gebruikt: A549, afgeleid van een humaan adenocarcinoom en H1299, afgeleid van een humaan grootcellig carcinoom. Beide cellijnen werden gekocht van de ATCC. De cellen werden gekweekt in RPMI-1640 medium aangevuld met 10 % foetaal runderserum (FBS), 1 % penicilline/streptomycine en 1 % glutamaat bij 37 °C in een vochtige atmosfeer van 5 %CO2.

Behandelingsomstandigheden
Dichlooracetaat
(DCA, Sigma 34795) werd aan de kweekmedia toegevoegd gedurende 1 uur vóór de bestraling in 10 en 20 mM voor H1299-cellen en 40 en 60 mM voor A549-cellen, overeenkomstig de respectieve IC50-waarden. De cellen werden bestraald met een Kimtron Polaris-bestralingstoestel met een dosistempo van 0,9 Gy/min bij kamertemperatuur.

Clonogene overlevingstest
De door ons gebruikte clonogene overlevingstest is eerder beschreven [19]. In het kort werden de cellen losgemaakt met trypsine, gesuspendeerd in volledige kweekmedia, geteld en uitgezaaid in schaaltjes van 3 ml bij een dichtheid van 200 cellen per schaaltje, en vervolgens een nacht laten hechten en stabiliseren. De volgende dag werden de testgroepen 1 uur voor de bestraling behandeld met DCA (of controle) in de aangegeven concentraties. De cellen werden bestraald met doses van 0, 2, 4 en 6 Gy. Na incubatie gedurende 48 uur werden de kweekmedia verwijderd en vervangen door verse kweekmedia zonder DCA (alle groepen). De cellen werden nog 10 dagen geïncubeerd om kolonievorming mogelijk te maken. Vervolgens werden de kolonies gefixeerd en gekleurd met 0,5 % kristalviolet in 96 % ethanol. Kolonies met ten minste 50 levensvatbare cellen werden geteld (fig. 2). Elk experiment werd in duplo uitgevoerd en het gemiddelde en de standaardafwijking werden berekend op basis van drie onafhankelijke experimenten.

Figuur 2. Stroomschema van de clonogene overlevingstest

Synergie-evaluatie
Om na te gaan of de behandelingsschema’s synergetische effecten vertonen, werden plots gemaakt van gemiddelden met standaarddeviaties van overlevingspercentages ten opzichte van stralingsdoses. De overlevingspercentages werden berekend, zowel voor de met DCA behandelde als voor de onbehandelde groepen, ten opzichte van die van onbestraalde cellen:

waarbij:

Specifiek werd de kolonievorming van zowel de met DCA behandelde als de zonder bestraling behandelde groepen genormaliseerd naar 100 %. Synergetische effecten werden bepaald door een tweezijdige ANOVA (p-waarde <0,05) [20].

Analyse van het zuurstofverbruik
Het zuurstof
verbruik werd gebruikt als surrogaatmarker voor mitochondriale activiteit. De metingen werden uitgevoerd met een XF24 extracellulaire fluxanalysator (Seahorse Biosciences). Dit apparaat maakt gebruik van op fluorescentie gebaseerde optische sensoren en aangepaste multi-wellplaten om herhaalde metingen van het zuurstofverbruik van intacte cellen die als monolayers groeien, uit te voeren. H1299- en A549-cellen werden in Seahorse XF24-celkweekplaten gezaaid met respectievelijk 10.000 en 20.000 cellen per well in groeimedium. De cellen werden 48 uur geïncubeerd bij 37 °C in 5 %CO2. Vervolgens werden de cellen gewassen en overgebracht in XF assay medium/PBS, en gedurende 60 minuten geïncubeerd bij 37 °C zonderCO2 alvorens het experiment te starten. Na vaststelling van de basislijn zuurstofverbruikssnelheden, werden 20 en 40 mM DCA toegevoegd aan H1299 en A549 cellen, respectievelijk. Zuurstofverbruik metingen werden voortgezet voor 25 min. Gegevens werden verkregen van ten minste drie replicaatplaten per cellijn. De resultaten worden weergegeven als percentage van de basislijnademhalingssnelheid.

Statistische analyse
Statistische significantie werd geëvalueerd met de t-toets van Student. De synergie werd geëvalueerd met een tweezijdige ANOVA [20]. Een waarde van p< 0,05 werd als significant beschouwd.

Resultaten

DCA radio-sensibiliseert NSCLC-cellen
Dichlooracetaat
(DCA) staat erom bekend dat het de mitochondriale activiteit verhoogt [10,15] en er is eerder aangetoond dat het werkt als een radio-sensibilisator in verschillende kankercellijnen afgeleid van prostaat-, colorectale en hersentumoren [21, 22]. Hier is het effect op twee van niet-kleincellige longkanker (NSCLC) afgeleide cellijnen onderzocht, namelijk A549 (adenocarcinoom) en H1299 (grootcellig carcinoom). De voor elke cellijn gebruikte concentraties DCA kwamen overeen met de respectieve IC50-waarden (A549: 63 mM en H1299: 36 mM; fig. 3a en b).

Figuur 3. Klonogene overleving van NSCLC-cellen behandeld met toenemende DCA-concentraties. a A549-cellen behandeld met 20, 40, 60 en 80 mM DCA. b H1299-cellen behandeld met 10, 20, 30 en 50 mM DCA. c A549-cellen behandeld met stralingsdoses van 2, 4 en 6 Gy alleen en in combinatie met 40 en 60 mM DCA. d H1299-cellen behandeld met stralingsdoses van 2, 4 en 6 Gy alleen en in combinatie met 10 en 20 mM DCA. *p< 0,05 vergeleken met controle

Wij vonden dat blootstelling aan DCA vóór bestraling de celdood verhoogde in zowel A549 als H1299 cellen. Het maximale effect in A549 cellen werd waargenomen bij 4 Gy, waar DCA-behandeling (40 en 60 mM) de celoverleving verminderde van ~55 tot 40% (p= 0,27) en 13% (p= 0,004), respectievelijk (Fig. 3c). In H1299-cellen werd het maximale effect bereikt bij 6 Gy. Bij deze stralingsdosis verminderde DCA-behandeling (10 en 20 mM) de celoverleving van 35 % (alleen straling) tot respectievelijk 25 en 17 % (niet statistisch significant; fig. 3d). Voorafgaande blootstelling van A549 cellen aan DCA (60 mM) verhoogde het cytotoxische effect van 4 Gy straling met een factor 4 vergeleken met straling alleen. Een tweezijdige ANOVA-analyse wees alleen bij A549-cellen op een synergetisch effect.

DCA verhoogt het zuurstofverbruik in zowel A549 als H1299 cellen
Een verhoogd cellulair zuurstofverbruik (OCR) is een indicatie van verhoogde mitochondriale activiteit [23]. Wij vonden dat DCA de OCR verhoogt in zowel A549 als H1299 cellen met respectievelijk 60% (p= 0,0037) en 20% (p= 0,0039), vergeleken met de basale OCR (Fig. 4).

Figuur 4. Zuurstofverbruikssnelheid (OCR) in A549 en H1299 cellen. DCA werd toegevoegd na ~16 min. a 20 mM DCA toegevoegd aan H1299-cellen. b 40 mM DCA toegevoegd aan A549-cellen. OCR veranderingen werden gemeten ten opzichte van de basale toestand. DCA verhoogde het zuurstofverbruik in A549- en H1299-cellen met respectievelijk 60%(p= 0,0037) en 20%(p= 0,0039)

Bespreking

Door de gevoeligheid voor straling met en zonder voorafgaande blootstelling aan dichlooracetaat (DCA) te testen, ontdekten we dat mitochondriale activering door DCA twee verschillende van niet-kleincellige longkanker (NSCLC) afgeleide cellijnen (A549 en H1299) radioactief kan verzwakken. In deze proof of concept studie werd een breed scala aan DCA-concentraties gebruikt, met als doel de dosis af te stemmen op de IC50-waarde van elke cel. Het synergetisch effect van DCA was statistisch significant in A549-cellen, terwijl het slechts in de buurt kwam van significantie in H1299-cellen. Mogelijk kan een nog robuuster effect worden verkregen met hogere DCA-doses. Wij toonden ook aan dat DCA het zuurstofverbruik verhoogt in zowel A549- als H1299-cellen, wat een surrogaatmarker is voor verhoogde mitochondriale activiteit.

Ioniserende straling verhoogt de functie van de mitochondriale elektronentransportketen en verhoogt de mitochondriale membraanpotentiaal en ATP-productie [9]. Mitochondriale hyperactivering door DCA verhoogt verder de hoeveelheid en de omvang van de vrijgekomen vrije radicalen (ROS) door de mitochondriën zelf [13]. Deze factoren kunnen het synergetisch effect verklaren dat wordt waargenomen door de cellen vooraf aan DCA bloot te stellen voordat de bestraling begint.

Atkinson et al. [15] toonden aan dat remming van cytochroom c peroxidase en het vrijkomen van cytochroom c uit mitochondriën de door straling veroorzaakte celdood vermindert. Lee et al. [24] constateerden een afname van de remming van ROS-gemedieerde celdood door blokkering van de nuclear factor erythroid 2 (nrf2)-afhankelijke anti-oxidant respons, waardoor de radiogevoeligheid van H1299, A549 en H640 cellen toeneemt. Deze studies toonden het vermogen aan om de cellulaire reactie op straling te beïnvloeden door in te grijpen in processen die verband houden met cytochroom c en ROS, en onderstrepen zo onze veronderstelling dat DCA kankercellen radiogevoelig maakt door mitochondriale activering waardoor ROS vrijkomen.

Cao et al. [21] rapporteerden eveneens dat DCA werkt als een radiosensibilisator in prostaatkankercellen. Zwicker et al. [22] vonden dat DCA in vitro maar niet in vivo als radiosensibilisator werkt in WIDR (colorectaal) en LN18 (glioom) cellen. Het gebrek aan synergie in het in vivo WIDR xenograft model werd verklaard door een buffereffect van de omgeving, waardoor de tumorcellen mogelijk hun glycolytisch stofwisselingsprogramma konden handhaven. Er moeten nog studies worden verricht om het in vivo effect van DCA en bestraling in NSCLC aan te tonen.

RT is een gebruikelijke therapie voor longkankerpatiënten. De aanzienlijke schade die zij toebrengt aan de omringende normale weefsels beperkt echter de toepassing ervan. Gedurende de laatste twee decennia zijn farmacologische remmers van signaalmoleculen die het apoptotisch potentieel regelen veelbelovend gebleken als radiosensibilisatoren in vitro [25,29]. Hoewel DCA is gerapporteerd als een radio-sensitizer bij prostaatkanker [21], is het klinische gebruik ervan in NSCLC tot nu toe niet bewezen. Hier tonen we het vermogen van DCA om de stralingsdosis in A549 en H1299 NSCLC-cellen te verlagen zonder het effectniveau aan te tasten. Door aan te tonen dat behandeling met DCA het zuurstofverbruik van zowel A549 als H1299 cellen verhoogt, hebben we bovendien het potentieel van DCA om als mitochondriale activator te fungeren blootgelegd. Daarom concluderen wij dat mitochondriale activering een rol kan spelen bij de behandeling van NSCLC indien geïntegreerd met bestraling. Bovendien veronderstellen wij dat de inductie van verhoogde mitochondriale activiteit, d.w.z. verhoogde afgifte van vrije radicalen en apoptose door DCA, de hoofdoorzaak is van het potentieel van DCA bij het radiogevoelig maken van NSCLC-cellen.

Samenvattend tonen wij aan dat in vitro mitochondriale inductie door DCA de A549 NSCLC-cellen op een synergetische manier significant radiosensibiliseert. Deze observatie verdient verdere beoordeling in een in vivo setting.

Dankbetuigingen

De auteurs danken Dr. Shoshana Paglin (Sheba Medical Center) voor begeleiding en vruchtbare discussies over dit werk.

Dit werk werd uitgevoerd als gedeeltelijke vervulling van de eisen voor de MD-scriptie van de Sackler Faculty of Medicine, Tel Aviv University en werd ondersteund door Sheba Medical Center. (De heer Ronen Shavit)

Belangenverstrengeling

De auteurs verklaren dat zij geen belangenconflict hebben.

VERWIJZINGEN

1 R. Siegel, C. DeSantis, K. Virgo, K. Stein, A. Mariotto, T. Smith, D. Cooper, T. Gansler, C. Lerro, S. Fedewa, C. Lin, C. Leach, R.S. Cannady, H. Cho, S. Scoppa, M. Hachey, R. Kirch, A. Jemal, E. Ward, Cancer treatment and survivorship statistics, 2012. CA Cancer J. Clin. 62(4), 220-241 (2012)
2 Q. Wu, Y.F. Chen, J. Fu, Q.H. You, S.M. Wang, X. Huang, X.J. Feng, S.H. Zhang, Short hairpin RNA-mediated down-regulation of CENP-A attenuates the aggressive phenotype of lung adenocarcinoma cells. Cell. Oncol. 37(6), 399-407 (2014)
3 A. Koren, H. Motaln, T. Cufer, Longkankerstamcellen: een biologisch en klinisch perspectief. Cell. Oncol. 36(4), 265-275 (2013)
4 N. Peled, M.W. Wynes, N. Ikeda, T. Ohira, K. Yoshida, J. Qian, M. Ilouze, R. Brenner, Y. Kato, C. Mascaux, F.R. Hirsch, Insulin-like growth factor-1 receptor (IGF-1R) als biomarker voor resistentie tegen de tyrosinekinaseremmer gefitinib in niet-kleincellige longkanker. Cell. Oncol. 36(4), 277-288 (2013)
5 M.V. Graham, J.A. Purdy, B. Emami, W. Harms, W. Bosch, M.A. Lockett, C.A. Perez, Clinical dose-volume histogram analysis for pneumonitis after 3D treatment for non-small cell lung cancer (NSCLC). Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 45(2), 323-329 (1999)
6 H. Vakifahmetoglu, M. Olsson, B. Zhivotovsky, Death through a tragedy: mitotic catastrophe. Cell Death Differ. 15(7), 1153-1162 (2008)
7 J. Thoms, R.G. Bristow, DNA repair targeting and radiotherapy: a focus on the therapeutic ratio. Semin. Radiat. Oncol. 20(4), 217-222 (2010)
8 C. Coleman, Beneficial liaisons: radiobiology meets cellular and molecular biology. Radiother Oncol: J. Eur. Soc. Ther. Radiol. Oncol. 28(1), 1-15 (1993)
1 T. Yamamori, H. Yasui, M. Yamazumi, Y. Wada, Y. Nakamura, H. Nakamura, O. Inanami, Ionizing radiation induces mitochondrial reactive oxygen species production accompanied by upregulation of mitochondrial electron transport chain function and mitochondrial content under control of the cell cycle checkpoint. Free Radic. Biol. Med. 53(2), 260-270 (2012)
10 I. Szumiel, Ionising radiation-induced oxidative stress, epigenetic changes and genomic instability: the pivotal role of mitochondria. Int J Radiat Biol. 1-55 (2014)
11 B.A. Rupnow, S.J. Knox, The role of radiation-induced apoptosis as a determinant of tumor responses to radiation therapy. Apoptose 4(2), 115-143 (1999)
12 R.A. Cairns, I.S. Harris, T.W. Mak, Regulation of cancer cell metabolism. Nat. Rev. Cancer 11(2), 85-95 (2011)
13 E.D. Michelakis, L. Webster, J.R. Mackey, Dichloroacetate (DCA) as a potential metabolic targeting therapy for cancer. Br. J. Cancer 99(7), 989-994 (2008)
14 X. Wang, S. Peralta, C.T. Moraes, Mitochondrial alterations during carcinogenesis: a review of metabolic transformation and targets for anticancer treatments. Adv. Cancer Res. 119, 127-160 (2013)
15 J. Atkinson, A.A. Kapralov, N. Yanamala, Y.Y. Tyurina, A.A. Amoscato, L. Pearce, J. Peterson, Z. Huang, J. Jiang, A.K. Samhan-Arias, A. Maeda, W. Feng, K. Wasserloos, N.A. Belikova, V.A. Tyurin, H. Wang, J. Fletcher, Y. Wang, I.I. Vlasova, J. Klein-Seetharaman, D.A. Stoyanovsky, H. Bayir, B.R. Pitt, M.W. Epperly, J.S. Greenberger, V.E. Kagan, A mitochondria-targeted inhibitor of cytochrome c peroxidase mitigates radiation-induced death. Nat. Commun. 2, 497 (2011)
16 S.H. Kim, Y.H. Yoo, J.H. Lee, J.W. Park, Mitochondrial NADP(+)-dependent isocitrate dehydrogenase knockdown inhibits tumorigenicity of melanoma cells. Biochem. Biophys. Res. Commun. 451(2), 246-251 (2014)
17 Z. Tatarkova, S. Kuka, M. Petras, P. Racay, J. Lehotsky, D. Dobrota, P. Kaplan, Why mitochondria are excellent targets for cancer therapy. Klin. Onkol. 25(6), 421-426 (2013)
18 S. Bonnet, S.L. Archer, J. Allalunis-Turner, A. Haromy, C. Beaulieu, R. Thompson, C.T. Lee, G.D. Lopaschuk, L. Puttagunta, G. Harry, K. Hashimoto, C.J. Porter, M.A. Andrade, B. Thebaud, E.D. Michelakis, A mitochondria-K+ channel axis is suppressed in cancer and its normalization promotes apoptosis and inhibits cancer growth. Kankercel 11(1), 37-51 (2007)
19 N.A. Franken, H.M. Rodermond, J. Stap, J. Haveman, C. van Bree, Clonogenic assay of cells in vitro. Nat. Protoc. 1(5), 2315-2319 (2006)
20 B.K. Slinker, The statistics of synergism. J. Mol. Cell. Cardiol. 30(4), 723-731 (1998)
21 W. Cao, S. Yacoub, K.T. Shiverick, K. Namiki, Y. Sakai, S. Porvasnik, C. Urbanek, C.J. Rosser, Dichloroacetate (DCA) sensitizes both wild-type and over expressing Bcl-2 prostate cancer cells in vitro to radiation. Prostaat 68(11), 1223-1231 (2008)
22 F. Zwicker, A. Kirsner, P. Peschke, F. Roeder, J. Debus, P.E. Huber, K.J. Weber, Dichloroacetate induceert tumorspecifieke radiosensitiviteit in vitro maar verzwakt stralingsgeïnduceerde tumorgroei vertraging in vivo. Strahlenther. Onkol. 189(8), 684-692 (2013)
23I. Papandreou, R.A. Cairns, L. Fontana, A.L. Lim, N.C. Denko, HIF-1 mediates adaptation to hypoxia by actively downregulating mitochondrial oxygen consumption. Cell Metab. 3(3), 187-197 (2006)
24 S. Lee, M.J. Lim, M.H. Kim, C.H. Yu, Y.S. Yun, J. Ahn, J.Y. Song, An effective strategy for increasing the radiosensitivity of Human lung Cancer cells by blocking Nrf2-dependent antioxidant responses. Free Radic. Biol. Med. 53(4), 807-816 (2012)
25 S.J. Chmura, H.J. Mauceri, S. Advani, R. Heimann, M.A. Beckett, E. Nodzenski, J. Quintans, D.W. Kufe, R.R. Weichselbaum, Verlaging van de apoptotische drempel van tumorcellen door remming van proteïnekinase C en activering van sfingomyelinase verhoogt de tumordoding door ioniserende straling. Cancer Res. 57(19), 4340-4347 (1997)
26 V. Bhardwaj, Y. Zhan, M.A. Cortez, K.K. Ang, D. Molkentine, A. Munshi, U. Raju, R. Komaki, J.V. Heymach, J. Welsh, C-Met inhibitor MK-8003 radiosensitiseert c-Met-expresserende niet-kleincellige longkankercellen. J. Thorac. Oncol. 7(8), 1211-1217 (2012)
27 E.J. Bernhard, G. Kao, A.D. Cox, S.M. Sebti, A.D. Hamilton, R.J. Muschel, W.G. McKenna, The farnesyltransferase inhibitor FTI-277 radiosensitizes H-ras-transformed rat embryo fibroblasts. Cancer Res. 56(8), 1727-1730 (1996)
28 H.J. Boeckman, K.S. Trego, J.J. Turchi, Cisplatin sensitizes cancer cells to ionizing radiation via inhibition of nonhomologous end joining. Mol. Cancer Res. 3(5), 277-285 (2005)
29 N. Balaban, J. Moni, M. Shannon, L. Dang, E. Murphy, T. Goldkorn, The effect of ionizing radiation on signal transduction: antibodies to EGF receptor sensitize A431 cells to radiation. Biochim. Biophys. Acta 1314(1-2), 147-156 (1996)

Gerelateerde inhoud:

Geef een reactie