Minghao Wang a, Cuiwei Liao a,b, Ying Hu a, Wenqin Pan a, Jun Jiang a,#
a Zentrum für Brustkrankheiten, Südwest-Krankenhaus, Dritte Medizinische Militäruniversität, Chongqing, 400038, Chinaab
Abteilung für Radiologie, Xinqiao-Krankenhaus, Dritte Medizinische Militäruniversität, Chongqing, 400038, China
Received: 14 May 2017Accepted
: Akzeptiert: 17. Mai
2017Online
verfügbar
: 19. Mai 2017
Zusammenfassung
Die Chemotherapie ist nach wie vor die wichtigste adjuvante Strategie bei der Behandlung von Krebserkrankungen, allerdings wird auch häufig eine Chemoresistenz festgestellt. Die Inhibition der Autophagie ist als vielversprechende therapeutische Strategie bei Krebs weithin anerkannt, doch der Mangel an wirksamen und spezifischen Autophagie-Inhibitoren behindert ihre Anwendung. Hier haben wir festgestellt, dass Dichloracetat (DCA), eine niedermolekulare Verbindung, die durch Doxorubicin induzierte Autophagie in Brustkrebszellen deutlich hemmen kann. DCA verstärkt deutlich den Doxorubicin-induzierten Zelltod und die Anti-Proliferation von Brustkrebszellen in vitro. Die Sensibilisierung für Dox durch DCA wurde jedoch durch die Induktion der Autophagie durch Rapamycin deutlich verringert. Darüber hinaus konnte die kombinierte Therapie von Dox und DCA das Tumorwachstum in vivo deutlich hemmen und die Überlebenszeit von Mäusen verlängern. Insgesamt zeigen wir, dass DCA die Doxorubicin-induzierende Autophagie hemmen kann und eine neuartige Strategie zur Verbesserung der krebsbekämpfenden Wirksamkeit der Chemotherapie darstellt.
Schlüsselwörter: Dichloroacetat; Brustkrebs; Autophagie; Chemotherapie
Highlights
:-Doxorubicin (Dox) induziert die Autophagie in Brustkrebszellen.
dCA sensibilisiert MDA-MB-231-Zellen für Dox durch Hemmung der Autophagie.
-Die Induktion der Autophagie durch Rapamycin beeinträchtigte die sensibilisierende Wirkung von DCA auf Dox.
-Synergistische Hemmung des Tumorwachstums bei Mäusen, die mit Dox und DCA behandelt wurden.
EINLEITUNG
Brustkrebs ist weltweit ein großes Problem der öffentlichen Gesundheit, und seine Universalität und Häufigkeit haben in den letzten Jahrzehnten deutlich zugenommen. Derzeit ist die Chemotherapie immer noch das wichtigste Mittel zur Behandlung von Brustkrebs. Inzwischen ist Brustkrebs unempfindlich gegenüber der üblichen Chemo- und Strahlentherapie [1], [2].
Bei der Autophagie werden Teile der doppelmembranigen Cytoplasmin-Vesikel, die Autophagosomen, sequestriert, die dann mit Lysosomen fusionieren, um Autolysosomen zu bilden, in denen die autophagische Fracht durch Katabolichydrolasen abgebaut wird. Die Autophagie ermöglicht es den Zellen, ihre eigenen Proteine und Organellen abzubauen, um die zelluläre Homöostase aufrechtzuerhalten, die für ein normales Wachstum und eine normale Entwicklung, die kurzfristige Anpassung an Stress sowie für das langfristige Überleben optimal ausgestatteter Zellen erforderlich ist [3], [4], [5]. Deregulationen der Autophagie sind an zahlreichen degenerativen Krankheiten, dem Altern und auch Krebs beteiligt [6], [7], [8], [9]. Insbesondere ist die Autophagie häufig eine überlebensfördernde Reaktion auf eine chemotherapeutische Behandlung in Krebszellen, und die Unterdrückung der Autophagie während einer Chemotherapie wurde als eine neue therapeutische Strategie vorgeschlagen [10].
Dichloracetat (DCA) ist ein kleiner Inhibitor der Pyruvat-Dehydrogenase-Kinase (PDK), die die Pyruvat-Dehydrogenase (PDH) aktiviert und die Glukoseoxidation erhöht, indem sie den Zufluss von Pyruvat in den Krebszyklus fördert. Kürzlich wurde nachgewiesen, dass DCA ein vielversprechendes, ungiftiges antineoplastisches Mittel ist, das die Apoptose in Karzinomzellen fördert [11], [12]. Der Zusammenhang zwischen DCA und Autophagie in Brustkrebszellen war jedoch unbekannt. In der vorliegenden Studie untersuchten wir die Wirkung von DCA auf die Modulation der Autophagie in menschlichen Brustkrebszellen. Wir fanden zum ersten Mal heraus, dass DCA die Autophagie in MDB-231-Zellen stark hemmt. Darüber hinaus untersuchten wir die Auswirkungen der Autophagiehemmung durch DCA auf die krebshemmende Wirkung von Chemotherapeutika. Die gleichzeitige Behandlung mit DCA verringerte deutlich die Lebensfähigkeit und erhöhte die Apoptose in Zellen, die mit Dox behandelt wurden, und die sensibilisierende Wirkung von DCA wurde durch die Behandlung mit Rapamycin deutlich verringert. Die synergistische Wirkung von DCA und Doxorubicin wurde auch in vivo in einem Maus-Xenograft-Modell bestätigt. Unsere Ergebnisse zeigen somit, dass die Hemmung der Autophagie durch DCA die Wirksamkeit von Doxorubicin stark erhöht und dass eine solche Kombination eine neue therapeutische Strategie für die Behandlung von Brustkrebs darstellen könnte.
Materialien und Methoden
Zellkultur
Die menschliche Brustkrebszelllinie MDA-MB-231 wurde von der American Type Culture Collection (ATCC, HTB-26) bezogen und in RPMI1640-Medium (Hyclone) gehalten. Die Medien wurden mit 10 % fötalem Rinderserum (Gibco) und 100 mg/ml Streptomycin (Gibco) angereichert. Die Zellen wurden in einem befeuchteten Inkubator mit 95 % Luft und 5 %CO2 bei 37 °C kultiviert.
Reagenzien
Die primären monoklonalen Kaninchen-Antikörper gegen LC3, P62 und β-Actin wurden von Cell Signaling bezogen. Die sekundären Antikörper aus Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG wurden von Santa Cruz Biotechnology erworben. Die FITC-Annexin V und PE-PI wurden von Biolegend bezogen. Für die dynamische Überwachung des mit der Autophagie verbundenen Proteins LC3 durch Immunfluoreszenz wurde das Adenovirus mit der Tandemkonstruktion EGFP-RFP-LC3 verwendet. Das Testkit für die Zelllebensfähigkeit (MTT) wurde von Sangon Biotech (Shanghai) erworben. Rapamycin wurde von Sigma-Aldrich und das Doxorubicin von Santa Cruz Biotechnology bezogen.
Western Blot
Die Proteine wurden nach der Medikation in Lysepuffer extrahiert und durch Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-PAGE) getrennt. Die Proteinkonzentrationen wurden mit dem BioRad™-Protein-Assay-Kit gemessen. Gleiche Mengen der Proteinproben wurden auf 7%-12%igem SDS-PAGE-Minigel elektrophoretisiert. Die Proteine wurden bei 100 V für 2 h bei 4 °C auf eine Immobilon PVDF-Membran übertragen. Die Membranen wurden über Nacht bei 4 °C mit dem angegebenen primären Antikörper beschichtet und anschließend mit einem an Meerrettichperoxidase gekoppelten sekundären Antikörper inkubiert. Die Visualisierung erfolgte durch 3-minütige Inkubation mit verstärktem Chemilumineszenz-Detektionspuffer (100 mM Tris-HCl pH 8,5, 1,25 mM Luminol, 0,2 mM p-Cumarsäure und 0,03 %H2O2), und die Bandenintensität wurde mit der Software Image J quantifiziert.
Immunfluoreszenzmikroskopie
Die Zellen wurden auf Deckgläsern in einer 24-Well-Platte ausgesät. Die Zellen wurden vor dem Experiment mit dem GFP-RFP-LC3 Adenovirus infiziert. Nach 24 Stunden wurde das Medium ausgetauscht und die Zellen wurden für weitere 24 Stunden mit DCA behandelt. Für die Immunfärbung wurden die Zellen 15 Minuten lang in 4 % Paraformaldehyd fixiert und gewaschen. Die Zellen wurden 5 Minuten lang mit DAPI inkubiert und dann mit PBS gewaschen. Die Deckgläser wurden mit Vectashield-Montagemittel auf Objektträger montiert. Die Bilder wurden mit einem konfokalen Mikroskop LSM780NLO (Carl Zeiss MicroImaging) aufgenommen und mit der vom Hersteller bereitgestellten Software bearbeitet.
Zelllebensfähigkeitstest (MTT)
Die Zellen wurden in 96-Well-Platten ausgesät und 24 Stunden lang wie angegeben behandelt. Dann wurden 10 μl MTT (5 mg/ml) pro Vertiefung zugegeben und 4 Stunden lang inkubiert. Jede Vertiefung wurde mit 100 μl DMSO ergänzt, um das Formazan aufzulösen, bevor es mit einem Mikroplattenlesegerät bei 490 nm gemessen wurde. Die Zelllebensfähigkeiten wurden auf die Kontrollgruppe normiert.
Durchflusszytometrie
Das Ausmaß der Apoptose wurde mittels Durchflusszytometriebestimmt. Die Zellen wurden geerntet, gewaschen und 45 Minuten lang mit Annexin V-Färbung inkubiert. Die Propidiumjodid-Färbung wurde vor der Analyse mittels Durchflusszytometrie hinzugefügt.
Statistische Analyse
Die Daten wurden mit der Statistiksoftware SPSS 21.0 ausgewertet. Die Messdaten wurden in Mittelwert ± Standardabweichung ausgedrückt. Für Vergleiche der Normalverteilung wurde der t-Test verwendet. Die einfaktorielle Varianzanalyse (ANOVA) wurde für Vergleiche zwischen den Gruppen verwendet. Die Zähldaten wurden in Prozent ausgedrückt und mit dem Chi-Quadrat-Test überprüft. P < 0,05 wurde als statistisch signifikant angesehen.
Ergebnisse
Dox-Behandlung induziert Autophagie in Brustkrebszellen
Neuere Studien haben gezeigt, dass die Autophagie von Tumorzellen während einer Chemotherapie induziert werden kann [8], [13]. Um festzustellen, ob Dox die Autophagie in menschlichen Brustkrebszellen beeinflusst, wurde die Anhäufung von Autophagosomen mit einem konfokalen Laser-Scanning-Mikroskop nachgewiesen, nachdem EGFP-RFP-LC3-Adenovirus infiziert worden war. Wie in Abb. 1A-B gezeigt, führte eine 24-stündige Behandlung der Zellen mit Dox zu einer deutlichen Zunahme der RFP-LC3-Punktbildung in MDA-MB-231-Zellen (p < 0,05). Anschließend untersuchten wir die Wirkung von Dox auf die Umwandlung der klassischen Autophagie-Proteine LC3B und P62 in MDA-MB-231-Zellen. Die Western-Blot-Analyse zeigte, dass eine 24-stündige Dox-Behandlung zu einer Akkumulation von LC3B-II und einer Abnahme von P62 (Ubiquitin-bindendes Rezeptorprotein) in einer dosis- (Abb. 1C-E) und zeitabhängigen Weise (Abb. 1F-H) führte (p < 0,05). Diese Ergebnisse zeigen, dass Dox in der Lage ist, die Autophagie in MDA-MB-231-Zellen zu induzieren.
DCA sensibilisiert den Doxorubicin-induzierten Zelltod durch Hemmung der Autophagie
Um den Einfluss der DCA-Behandlung auf die Arzneimittelempfindlichkeit von MDA-MB-231-Zellen gegenüber Dox zu untersuchen, haben wir daher die Apoptose von MDA-MB-231-Zellen nach Behandlung mit Dox mit oder ohne DCA nachgewiesen. Wie in Abb. 2A-B zu sehen ist, verursachte die Behandlung von MDA-MB-231-Zellen mit unterschiedlichen Konzentrationen von Dox und DCA über 24 Stunden eine höhere Apoptose im Vergleich zur alleinigen Behandlung mit Dox, wie FACS zeigt (p < 0,05). Die Ergebnisse des Proliferationsversuchs zeigten, dass DCA ab dem 24-Stunden-Zeitpunkt einen synergistischen Effekt auf die antiproliferative Wirkung von Dox hatte (Abb. 2C-D). Es wurde angenommen, dass die Hemmung der Autophagie in Tumorzellen die Empfindlichkeit von Chemotherapeutika erhöht [8], [13], [14]. Um festzustellen, ob DCA die durch Dox induzierte Autophagie in MDA-MB-231-Zellen beeinträchtigen könnte, untersuchten wir als Nächstes die Veränderung des Spiegels der Autophagie-Proteine mittels indirektem Immunfluoreszenztest und Western Blotting. Die Behandlung von Zellen mit Dox oder Rapamycin führte zu einer deutlichen Zunahme der RFP-LC3-Punktbildung in MDA-MB-231-Zellen, die bei gleichzeitiger Behandlung mit DCA deutlich abnahm (Abb. 1A, Abb. 2E-F). Obwohl der LC3-II-Spiegel nach der Dox-Behandlung anstieg, war der LC3-II-Spiegel nach der kombinierten Behandlung von Dox und DCA am schwächsten, und der Spiegel des P62-Proteins war nach der Co-Behandlung deutlich erhöht (Abb. 2G-I). All diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass DCA die Empfindlichkeit von MDA-MB-231-Zellen gegenüber Dox durch Hemmung der Autophagie in vitro erhöht.
DieInduktion der Autophagie durch Rapamycin verringerte die Arzneimittelempfindlichkeit von DCA und Dox
Um weiter zu bestätigen, dass die Autophagiehemmung durch DCA die Wirkung der Kombinationschemotherapie verbessern könnte, wurde Rapamycin, ein klassischer Autophagiebeschleuniger, zur Induktion der Autophagie verwendet. Wie Abb. 3 A-B zeigt, stieg die Apoptose nach der gemeinsamen Behandlung mit Dox und DCA im Vergleich zur alleinigen Dox-Behandlung zwar deutlich an, nach der kombinierten Behandlung mit Rapamycin war die Apoptose jedoch deutlich geringer (p < 0,05). Die Ergebnisse des MTT-Experiments zeigten, dass Rapamycin eine anantagonistische Wirkung auf die antiproliferative Wirkung von Dox und DCA ab dem 24-Stunden-Zeitpunkt hatte (p < 0,05) (Abb. 3C). Die Ergebnisse zeigten, dass die LC3-II-Konzentration in der DDR-Gruppe (Dox, DCA und Rapamycin) im Vergleich zu der mit DD (Dox und DCA) behandelten Gruppe deutlich erhöht und die p62-Bande signifikant reduziert war (Abb. 3D-F). Diese Ergebnisse bestätigen, dass DCA die Doxorubicin-induzierte Apoptose der MDA-MB-231-Zellen durch Hemmung der Autophagie sensibilisiert.
DieIn-vivo-Hemmung der Autophagie durch DCA verstärkt die krebshemmende Wirkung von Dox
Da Dox nach der Hemmung der Autophagie einen stärkeren Zelltod auslöst, haben wir das Potenzial der kombinierten Therapie von Dox und DCA in vivo untersucht. Als der Tumor tastbar war, wurden die Tiere behandelt mit: (1) PBS, (2) Dox, (3) DCA und (4) Dox plus DCA. Wie in Abb. 4A-B zu sehen ist, zeigte die alleinige Behandlung mit Dox oder DCA im Vergleich zu PBS zwar eine gewisse Hemmwirkung auf das Tumorwachstum. Die kombinierte Behandlung mit Dox und DCA hemmte jedoch das Tumorwachstum erheblich und verlängerte die Überlebenszeit der Mäuse (p < 0,05). Wie in Abb. 4C gezeigt, erhöhte sich die Tumorverdopplungszeit signifikant von 4,65 Tagen (CI, 4,17-5,85 Tage) in der Dox-Gruppe auf 8,80 Tage (CI, 7,33-10,3 Tage) in der Dox-plus-DCA-Gruppe (p < 0,05).
Diskussion
Die Chemotherapie ist nach wie vor die wichtigste Strategie in der Krebsbehandlung, allerdings entwickelt sich die Toleranz immer nur für einen kurzen Zeitraum. Daher konzentriert sich die aktuelle Forschung auf die Suche nach neuen Wegen zur Sensibilisierung oder Verzögerung der Arzneimittelresistenz. Gegenwärtig wird die Auffassung vertreten, dass Krebszellen den Stress von außen und die Hypoxie durch die Regulierung der Autophagie tolerieren könnten.
Autophagie ist ein physiologisches Verhalten, das zur Aufrechterhaltung der zellulären Homöostase beiträgt. Durch diesen Prozess werden alternde oder defekte Proteine, Organellen und andere zelluläre Komponenten zum Abbau und Recycling an das Lysosom abgegeben [15], [16]. In den letzten Jahren wurde in zahlreichen Studien versucht, die Autophagie mit Krebs und Krebstherapie in Verbindung zu bringen [8], [13], [17]. Es wurde festgestellt, dass die meisten Krebsmedikamente sowie ionisierende Strahlung oder zielgerichtete Medikamente die Autophagie der Tumorzellen während der Behandlung induzieren [18], [19], [20]. Die Hemmung der Autophagie in Tumorzellen wurde als eine Strategie zur Sensibilisierung der Chemo- und Strahlentherapie angesehen [8], [21], [22]. Obwohl die Hemmung der Autophagie in Tumorzellen weithin als vielversprechendes therapeutisches Projekt bei Krebs anerkannt ist, wird ihre Anwendung durch den Mangel an wirksamen und spezifischen Autophagie-Inhibitoren behindert. Chloroquin und Hydroxychloroquin sind die einzigen beiden von der FDA zugelassenen Autophagie-Inhibitoren. Kürzlich wurden mehrere klinische Studien der Phase I/II durchgeführt, in denen die Autophagie mit Chloroquin oder Hydroxychloroquin in Kombination mit Chemotherapie zur Behandlung verschiedener Krebsarten, einschließlich Brustkrebs, gehemmt wurde [13], [23]. Daher ist die Entwicklung einer neuen Art von Autophagie-Inhibitor für die Behandlung von Krebs von großer klinischer Bedeutung. DCA hemmt das kritische Enzym Pyruvat-Dehydrogenase-Kinase (PDK), was zu einer Veränderung der mitochondrialen Atmung der Tumorzelle und zur Apoptose führt [11]. Bis heute gibt es keine Hinweise darauf, ob DCA an der Autophagie-Regulation in Brustkrebszellen beteiligt ist. In der vorliegenden Studie konnten wir nachweisen, dass DCA die Fähigkeit besitzt, die Autophagie zu hemmen und den durch Chemotherapeutika ausgelösten Zelltod bei Brustkrebs deutlich zu verstärken. Allerdings wurde die Sensibilisierung auf Dox von DCA durch die Behandlung mit Rapamycin deutlich reduziert. Nach unserem Kenntnisstand ist dies der erste Bericht, der die Wirksamkeit der Autophagiehemmung durch DCA in Kombination mit Doxorubicin bei Brustkrebszellen in vitro und invivo nachweist. Wir wussten jedoch nicht, ob die durch andere Chemotherapie-Medikamente induzierte Autophagie durch DCA gehemmt werden kann, weshalb weitere Forschungen zur Universalität von DCA durchgeführt werden müssen.
Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die vorliegenden Ergebnisse zeigen, dass die Hemmung der Autophagie durch DCA die Doxorubicin-vermittelte Apoptose verstärkt und eine neue Forschungsperspektive für die Suche nach Autophagie-Inhibitoren für die Kombinationschemotherapie bietet. Unsere Ergebnisse deuten darauf hin, dass DCA möglicherweise als neuer Autophagie-Inhibitor weiterentwickelt werden könnte, und eine Kombination von DCA mit klassischen Chemotherapeutika könnte eine neue therapeutische Strategie zur Behandlung von Brustkrebs darstellen.
Interessenkonflikt
Die Autoren erklären, dass es keinen Interessenkonflikt gibt.
Danksagung
Diese Arbeit wurde durch das Projekt des Southwest Hospital[cstc2015shms-ztzx10005] unterstützt.
REFERENZEN
1 Ferlay J, Soerjomataram I, Dikshit R, Eser S, Mathers C, Rebelo M, Parkin DM, Forman D und Bray F. Cancer incidence and mortality worldwide: sources, methods and major patterns in GLOBOCAN 2012. Int J Cancer 2015; 136: E359-386.
2 Siegel RL, Miller KD und Jemal A. Cancer Statistics, 2017. CA Cancer J Clin 2017; 67: 7-30.
3 Jiang X, Overholtzer M and Thompson CB. Autophagy in cellular metabolism and cancer. J Clin Invest 2015; 125: 47-54.
4 Klionsky DJ and Emr SD. Autophagie als regulierter Weg des zellulären Abbaus. Science 2000; 290: 1717-1721.
5 Mizushima N und Komatsu M. Autophagie: Renovierung von Zellen und Geweben. Cell 2011; 147: 728-741.
6 Hara T, Nakamura K, Matsui M, Yamamoto A, Nakahara Y, Suzuki-Migishima R, Yokoyama M, Mishima K, Saito I, Okano H und Mizushima N. Suppression of basal autophagy in neural cells causes neurodegenerative disease in mice. Natur 2006; 441: 885-889.
7 Hardie DG. Zellbiologie. Warum hungernde Zellen sich selbst fressen. Science 2011; 331: 410-411.
8 Mathew R, Karantza-Wadsworth V und White E. Role of autophagy in cancer. Nat Rev Cancer 2007; 7: 961-967.
9 Rubinsztein DC, Marino G und Kroemer G. Autophagy and aging. Cell 2011; 146: 682-695.
10 Rubinsztein DC, Codogno P und Levine B. Autophagy modulation as a potential therapeutic target for various diseases. Nat Rev Drug Discov 2012; 11: 709-730.
11 Bonnet S, Archer SL, Allalunis-Turner J, Haromy A, Beaulieu C, Thompson R, Lee CT, Lopaschuk GD, Puttagunta L, Bonnet S, Harry G, Hashimoto K, Porter CJ, Andrade MA, Thebaud B und Michelakis ED. Eine Mitochondrien-K+-Kanal-Achse ist bei Krebs unterdrückt und ihre Normalisierung fördert die Apoptose und hemmt das Krebswachstum. Krebszelle 2007; 11: 37-51.
12 Cao W, Yacoub S, Shiverick KT, Namiki K, Sakai Y, Porvasnik S, Urbanek C und Rosser CJ. Dichloracetat (DCA) sensibilisiert sowohl Wildtyp- als auch überexprimierende Bcl-2-Prostatakrebszellen in vitro für Strahlung. Prostata 2008; 68: 1223-1231.
13 Janku F, McConkey DJ, Hong DS und Kurzrock R. Autophagy as a target for anticancer therapy. Nat Rev Clin Oncol 2011; 8: 528-539.
14 Kondo Y, Kanzawa T, Sawaya R und Kondo S. The role of autophagy in cancer development and response to therapy. Nat Rev Cancer 2005; 5: 726-734.
15 Mizushima N. Autophagie: Prozess und Funktion. Genes Dev 2007; 21: 2861-2873.
16 Ravikumar B, Sarkar S, Davies JE, Futter M, Garcia-Arencibia M, Green-Thompson ZW, Jimenez-Sanchez M, Korolchuk VI, Lichtenberg M, Luo S, Massey DC, Menzies FM, Moreau K, Narayanan U, Renna M, Siddiqi FH, Underwood BR, Winslow AR und Rubinsztein DC. Die Regulierung der Autophagie bei Säugetieren in der Physiologie und Pathophysiologie. Physiol Rev 2010; 90: 1383-1435.
17 Kondo Y und Kondo S. Autophagie und Krebstherapie. Autophagy 2006; 2: 85-90.
18 Degenhardt K, Mathew R, Beaudoin B, Bray K, Anderson D, Chen G, Mukherjee C, Shi Y, Gelinas C, Fan Y, Nelson DA, Jin S und White E. Autophagie fördert das Überleben von Tumorzellen und schränkt Nekrose, Entzündung und Tumorigenese ein. Krebszelle 2006; 10: 51-64.
19 Kim DG, Jung KH, Lee DG, Yoon JH, Choi KS, Kwon SW, Shen HM, Morgan MJ, Hong SS und Kim YS. 20(S)-Ginsenosid Rg3 ist ein neuartiger Inhibitor der Autophagie und sensibilisiert das hepatozelluläre Karzinom für Doxorubicin. Oncotarget 2014; 5: 4438-4451.
20 Manov I, Pollak Y, Broneshter R und Iancu TC. Inhibition of doxorubicin-induced autophagy in hepatocellular carcinoma Hep3B cells by sorafenib–the role of extracellular signal-regulated kinase counteraction. FEBS J 2011; 278: 3494-3507.
21 Chen K and Shi W. Autophagie reguliert die Resistenz von nicht-kleinzelligen Lungenkrebszellen gegen Paclitaxel. Tumour Biol 2016; 37: 10539-10544.
22 Zhou J, Li G, Zheng Y, Shen HM, Hu X, Ming QL, Huang C, Li P und Gao N. A novel autophagy/mitophagy inhibitor liensinine sensitizes breast cancer cells to chemotherapy through DNM1L-mediated mitochondrial fission. Autophagy 2015; 11: 1259-1279.
23 Kimura T, Takabatake Y, Takahashi A und Isaka Y. Chloroquine in cancer therapy: a double-edged sword of autophagy. Cancer Res 2013; 73: 3-7.
Verwandte Inhalte: